Ang pagsusuri sa laboratoryo ng halos lahat ng mga nakakahawang sakit ay batay sa pagtuklas ng mga antibodies sa dugo ng pasyente, na ginawa laban sa mga antigen ng pathogen, sa pamamagitan ng mga pamamaraan ng serological reactions. Pumasok sila sa medikal na pagsasanay mula sa huling bahagi ng ikalabinsiyam hanggang unang bahagi ng ikadalawampu siglo.
Nakatulong ang pag-unlad ng agham na matukoy ang antigenic na istraktura ng mga microbes at ang mga kemikal na formula ng kanilang mga lason. Ginawa nitong posible na lumikha hindi lamang therapeutic, kundi pati na rin diagnostic sera. Nakukuha ang mga ito sa pamamagitan ng pagbibigay ng mga attenuated pathogen sa mga hayop sa laboratoryo. Pagkatapos ng ilang araw na pagkakalantad, ang dugo ng mga kuneho o daga ay ginagamit upang maghanda ng mga paghahandang ginagamit upang matukoy ang mga mikrobyo o ang kanilang mga lason gamit ang mga serological na pagsusuri.
Ang panlabas na pagpapakita ng naturang reaksyon ay nakasalalay sa mga kondisyon ng pagtatakda nito at sa estado ng mga antigen sa dugo ng pasyente. Kung ang mga microbial particle ay hindi matutunaw, sila ay namuo, nagli-lyse, nagbubuklod o hindi kumikilos sa suwero. Kung natutunaw ang mga antigen, lilitaw ang phenomenon ng neutralization o precipitation.
Agglutination reaction (RA)
Ang serological agglutination test ay lubos na tiyak. Ito ay madaling isagawa at medyovisual, upang mabilis na matukoy ang pagkakaroon ng mga antigens sa suwero ng dugo ng pasyente. Ito ay ginagamit upang subukan ang Vidal reaction (diagnosis ng typhoid at paratyphoid fever) at Weigl (typhoid fever).
Ito ay nakabatay sa isang partikular na pakikipag-ugnayan sa pagitan ng mga antibodies ng tao (o agglutinin) at mga microbial cell (agglutenogens). Pagkatapos ng kanilang pakikipag-ugnayan, ang mga particle ay nabuo na namuo. Isa itong positibong senyales. Maaaring gamitin ang mga live o pinatay na microbial agent, fungi, protozoa, blood cells at somatic cells para i-set up ang reaksyon.
Sa kemikal, ang reaksyon ay nahahati sa dalawang hakbang:
- Specific na koneksyon ng antibodies (AT) na may antigens (AG).
- Non-specific - pag-ulan ng AG-AT conglomerates, iyon ay, ang pagbuo ng agglutinate.
Indirect Agglutination Reaction (IPHA)
Ang reaksyong ito ay mas sensitibo kaysa sa nauna. Ito ay ginagamit upang masuri ang mga sakit na dulot ng bacteria, intracellular parasites, at protozoa. Napakaspesipiko nito na kahit na napakababang konsentrasyon ng mga antibodies ay maaaring matukoy.
Purified sheep erythrocytes at human red blood cell pre-treated na may antibodies o antigens ay ginagamit para sa produksyon nito (depende sa kung ano ang gustong mahanap ng laboratory technician). Sa ilang mga kaso, ang mga pulang selula ng dugo ng tao ay ginagamot ng mga immunoglobulin. Ang mga serological na reaksyon ng mga erythrocytes ay itinuturing na naganap kung sila ay tumira sa ilalim ng tubo. Tungkol sa isang positibong reaksyonsabihin kapag ang mga cell ay nakaayos sa anyo ng isang baligtad na payong, na sumasakop sa buong ilalim. Ang isang negatibong reaksyon ay binibilang kung ang mga erythrocyte ay tumira sa isang column o sa anyo ng isang button sa gitna ng ibaba.
Reaksyon sa pag-ulan (RP)
Ang mga serological na reaksyon ng ganitong uri ay ginagamit upang makita ang napakaliit na particle ng antigens. Ang mga ito ay maaaring, halimbawa, mga protina (o mga bahagi nito), mga compound ng mga protina na may mga lipid o carbohydrates, mga bahagi ng bacteria, ang kanilang mga lason.
Ang Sera para sa reaksyon ay nakukuha ng artipisyal na nakakahawa na mga hayop, kadalasang mga kuneho. Sa pamamaraang ito, maaari kang makakuha ng ganap na anumang precipitating serum. Ang setting ng serological precipitation reactions ay katulad sa mekanismo ng pagkilos sa agglutination reactions. Ang mga antibodies na nakapaloob sa suwero ay pinagsama sa mga antigen sa isang koloidal na solusyon, na bumubuo ng malalaking molekula ng protina na idineposito sa ilalim ng tubo o sa substrate (gel). Ang pamamaraang ito ay itinuturing na lubos na partikular at maaaring makakita ng kahit na hindi gaanong halaga ng isang sangkap.
Ginagamit sa pag-diagnose ng salot, tularemia, anthrax, meningitis at iba pang sakit. Bilang karagdagan, siya ay kasangkot sa isang forensic medical examination.
Gel precipitation reaction
Ang mga serological na reaksyon ay maaaring isagawa hindi lamang sa isang likidong daluyan, kundi pati na rin sa agar gel. Ito ay tinatawag na diffuse precipitation method. Sa tulong nito, pinag-aralan ang komposisyon ng mga kumplikadong antigenic mixtures. Ang pamamaraang ito ay batay sa chemotaxis ng antigens sa antibodies at vice versa. Sa isang gel ay gumagalaw silapatungo sa isa't isa sa iba't ibang bilis at, pagpupulong, bumubuo ng mga linya ng pag-ulan. Ang bawat linya ay isang set ng AG-AT.
Exotoxin neutralization reaction with antitoxin (PH)
Ang mga antitoxic na serum ay nagagawang neutralisahin ang pagkilos ng exotoxin na ginawa ng mga microorganism. Ang mga serological reaksyon na ito ay batay dito. Ginagamit ng mikrobiyolohiya ang pamamaraang ito upang i-titrate ang sera, mga toxin at toxoid at matukoy ang kanilang aktibidad na panterapeutika. Ang kapangyarihan ng neutralisasyon ng lason ay tinutukoy ng mga nakasanayang yunit - AE.
Bilang karagdagan, salamat sa reaksyong ito, posibleng matukoy ang species o uri ng exotoxin. Ginagamit ito sa pagsusuri ng tetanus, dipterya, botulism. Ang pag-aaral ay maaaring isagawa kapwa "sa salamin" at sa gel.
Reaksyon ng lysis (RL)
Immune serum, na pumapasok sa katawan ng pasyente, ay may, bilang karagdagan sa pangunahing function nito ng passive immunity, pati na rin ang lysing properties. Nagagawa nitong i-dissolve ang mga microbial agent, cellular foreign elements at mga virus na pumapasok sa katawan ng pasyente. Depende sa pagtitiyak ng mga antibodies na kasama sa serum, ang mga bacteriolysin, cytolysin, spirochetolizin, hemolysin at iba pa ay nakahiwalay.
Ang mga partikular na antibodies na ito ay tinatawag na "complement". Ito ay matatagpuan sa halos lahat ng likido sa katawan ng tao, may kumplikadong istraktura ng protina at napaka-sensitibo sa pagtaas ng temperatura, pagyanig, mga acid at direktang sikat ng araw. Ngunit sa tuyong estado ito ay nakakapagpanatiliang mga lysing properties nito hanggang anim na buwan.
May mga ganitong uri ng serological na reaksyon ng ganitong uri:
- bacteriolysis;
- hemolysis.
Ang Bacteriolysis ay isinasagawa gamit ang blood serum ng pasyente at partikular na immune serum na may mga live microbes. Kung may sapat na complement sa dugo, makikita ng researcher ang bacteria lyse, at ang reaksyon ay maituturing na positibo.
Ang pangalawang serological na reaksyon ng dugo ay ang pagsususpinde ng mga pulang selula ng dugo ng pasyente ay ginagamot ng serum na naglalaman ng mga hemolysin, na isinaaktibo lamang sa pagkakaroon ng isang tiyak na papuri. Kung mayroong isa, pagkatapos ay sinusunod ng katulong sa laboratoryo ang paglusaw ng mga pulang selula ng dugo. Ang reaksyong ito ay malawakang ginagamit sa modernong medisina upang matukoy ang complement titer (iyon ay, ang pinakamaliit na halaga nito na nag-uudyok sa erythrocyte lysis) sa serum ng dugo at upang magsagawa ng pagsusuri para sa pag-aayos ng komplemento. Sa ganitong paraan nagsasagawa ng serological test para sa syphilis - ang reaksyon ng Wasserman.
Complement fixation reaction (CFR)
Ginagamit ang reaksyong ito upang makita ang mga antibodies sa isang nakakahawang ahente sa serum ng dugo ng pasyente, gayundin upang matukoy ang pathogen sa pamamagitan ng antigenic na istraktura nito.
Hanggang sa puntong ito, inilarawan namin ang mga simpleng serological na reaksyon. Ang RSK ay itinuturing na isang kumplikadong reaksyon, dahil hindi dalawa, ngunit tatlong elemento ang nakikipag-ugnayan dito: antibody, antigen at pandagdag. Ang kakanyahan nito ay nakasalalay sa katotohanan na ang pakikipag-ugnayan sa pagitan ng antibody at antigennangyayari lamang sa pagkakaroon ng mga complement protein, na na-adsorbed sa ibabaw ng nabuong AG-AT complex.
Ang mga antigen mismo, pagkatapos ng pagdaragdag ng pandagdag, ay sumasailalim sa mga makabuluhang pagbabago, na nagpapakita ng kalidad ng reaksyon. Maaari itong maging lysis, hemolysis, immobilization, bactericidal o bacteriostatic action.
Ang reaksyon mismo ay nangyayari sa dalawang yugto:
- Pagbuo ng antigen-antibody complex na hindi nakikita ng tagasuri.
- Pagbabago sa antigen sa ilalim ng pagkilos ng complement. Ang bahaging ito ay madalas na matutunton sa mata. Kung ang reaksyon ay hindi nakikita, pagkatapos ay isang karagdagang indicator system ang gagamitin upang matukoy ang mga pagbabago.
Sistema ng tagapagpahiwatig
Ang reaksyong ito ay batay sa complement fixation. Ang purified ram erythrocytes at complement-free hemolytic serum ay idinaragdag sa test tube isang oras pagkatapos itakda ang RSC. Kung ang isang hindi nakatali na pandagdag ay nananatili sa test tube, pagkatapos ay sasali ito sa AG-AT complex na nabuo sa pagitan ng mga selula ng dugo ng tupa at hemolysin, at magiging dahilan upang matunaw ang mga ito. Nangangahulugan ito na negatibo ang RSK. Kung ang mga erythrocyte ay nanatiling buo, kung gayon, ayon dito, ang reaksyon ay positibo.
Hemagglutination test (RGA)
Mayroong dalawang pangunahing magkaibang reaksyon ng hemagglutination. Ang isa sa kanila ay serological, ginagamit ito upang matukoy ang mga grupo ng dugo. Sa kasong ito, nakikipag-ugnayan ang mga pulang selula ng dugo sa mga antibodies.
At ang pangalawaang reaksyon ay hindi nalalapat sa serological, dahil ang mga pulang selula ng dugo ay tumutugon sa mga hemagglutinin na ginawa ng mga virus. Dahil ang bawat pathogen ay kumikilos lamang sa mga partikular na erythrocytes (manok, tupa, unggoy), ang reaksyong ito ay maaaring ituring na lubos na tiyak.
Maaari mong malaman kung ang isang reaksyon ay positibo o negatibo sa pamamagitan ng lokasyon ng mga selula ng dugo sa ilalim ng test tube. Kung ang kanilang pattern ay kahawig ng isang baligtad na payong, kung gayon ang nais na virus ay naroroon sa dugo ng pasyente. At kung ang lahat ng mga erythrocyte ay nabuo tulad ng isang haligi ng barya, kung gayon ay walang gustong mga pathogens.
Hemagglutination inhibition test (HITA)
Ito ay isang napakaspesipikong reaksyon na nagbibigay-daan sa iyong matukoy ang uri, uri ng mga virus o ang pagkakaroon ng mga partikular na antibodies sa serum ng dugo ng pasyente.
Ang kakanyahan nito ay nakasalalay sa katotohanan na ang mga antibodies na idinagdag sa test tube na may materyal na pansubok ay pumipigil sa pag-deposito ng mga antigen sa mga erythrocytes, at sa gayon ay humihinto sa hemagglutination. Isa itong qualitative sign ng presensya sa dugo ng mga partikular na antigens para sa partikular na virus na hinahanap.
Immunofluorescence reaction (RIF)
Ang reaksyon ay nakabatay sa kakayahang makakita ng mga AG-AT complex na may fluorescent microscopy pagkatapos ng kanilang paggamot na may mga fluorochrome dyes. Ang pamamaraang ito ay madaling hawakan, hindi nangangailangan ng paghihiwalay ng purong kultura at tumatagal ng kaunting oras. Ito ay kailangang-kailangan para sa mabilis na pagsusuri ng mga nakakahawang sakit.
Sa pagsasagawa, ang mga serological na reaksyong ito ay nahahati sa dalawang uri: direkta at hindi direkta.
Direct RIF ay ginawa mula saantigen, na pre-treated na may fluorescent serum. At ang hindi direktang isa ay ang unang gamot ay ginagamot sa isang maginoo diagnosticum na naglalaman ng mga antigens para sa mga antibodies ng interes, at pagkatapos ay ang luminescent serum, na tiyak para sa mga protina ng AG-AT complex, ay muling inilapat, at mga microbial cell. maging nakikita sa ilalim ng mikroskopya.
