Ang Hepatitis C ay isang impeksyon sa atay na dulot ng Flaviviridae HCV virus, na binubuo ng isa o higit pang mga molekula ng RNA. Bilang isang tuntunin, isang serye ng mga diagnostic na hakbang ang ginagawa upang maitaguyod ang hepatitis C sa isang pasyente. Ang PCR ay isang pagsusuri na tumpak na nagpapatunay sa diagnosis. Kadalasan ang konklusyon ay ibinibigay ng mga doktor kapag ang pasyente ay mayroon nang mga unang senyales ng sakit.
Ano ang hepatitis C
Ang pinsala sa atay ng isang impeksyon sa viral na naipapasa sa pamamagitan ng dugo o pakikipagtalik ay tinatawag na hepatitis C sa gamot. Ang causative agent ay isang virus na naglalaman ng RNA ng mga non-cellular infectious agent ng pamilya Flaviviridae. Ang impeksiyon ay maaaring manatili sa katawan ng mahabang panahon nang hindi nagpapakita ng sarili. Samakatuwid, kapag natukoy lamang ang isang microorganism gamit ang pagsusuri ng dugo gamit ang PCR RNA RNA, ang hepatitis C (bilang isang diagnosis) ay itinuturing na makatwiran.
Ang Flavivirus ay hindi ginawa sa mga nakahiwalay na cell na artipisyal na lumaki. Sa proseso ng pagpaparami, ang nakakahawang ahente ay lumilikha ng mga immunologically natatanging pagbabago. Ang mga salik na ito ay pumipigil sa katawan sa pagbibigaynaaangkop na pagtugon sa proteksyon, at nahihirapan ang mga eksperto sa pagbuo ng mabisang bakuna.
Ang virus ay ipinadala sa parenteral. Para sa impeksyon, dapat itong pumasok sa sapat na dami nang direkta sa daluyan ng dugo.
Anong mga pagsusuri ang ginagawa para sa hepatitis C
Viral pathologies ng atay ay nasuri gamit ang mga pagsubok sa laboratoryo. Ang mga klinikal na pag-aaral ng hepatitis C ay isinasagawa sa pamamagitan ng pag-aaral ng mga banyaga at mapanganib na antigen o mga compound ng protina (antibodies) sa biomaterial ng pasyente, pangunahin sa dugo.
- Enzymatic immunoassay (ELISA). Ang pamamaraan ay batay sa pagtuklas ng lgM antibodies sa dugo. Ang immunoglobulin ay itinuturing na pinakamalaki at isang pentamer. Ito ay nagpapakita ng sarili sa pangunahing proteksiyon na tugon ng mga lymphocyte sa isang hindi kilalang banyagang substance.
- Radioimmunoassay (RIA) - quantitative determination ng lgM immunoglobulin gamit ang may label na radioactive isotope ng iodine.
- PCR ng hepatitis C - pagtukoy ng viral RNA sa biomaterial (dugo). Ang pagsusuring ito ay mapagkakatiwalaang kinukumpirma ang diagnosis.
Ang IgG testing ay hindi maaasahan. Ang presensya nito sa serum ng dugo ay maaaring magpahiwatig hindi lamang ng pagkakaroon ng flavivirus, kundi pati na rin ng isa pang nakaraang impeksiyon na may parehong pathogen.
Ano ang tumutukoy sa pagsusuri sa PCR
Ang Polymerase chain reaction (PCR) ay batay sa pagkakakilanlan ng mga rehiyon ng DNA na partikular para sa ilang partikular na pathogen sa mga sample ng materyal para sa pananaliksik (epithelium, dugo). Ginagawang posible ng pagsusuri na matukoy ang mga pathogen na pinakamaliit na organismo (mga virus) sa pamamagitan ng pag-detect ng kanilang RNA o DNA sa biological na materyal.
Ang pamamaraan sa laboratoryo para sa pagtuklas ng mga antibodies Hepatitis C PCR ay isinasagawa sa 3 yugto:
- Piliin. Ang pinag-aralan na biomaterial ay dinadalisay mula sa mga impurities at ang DNA ay nakuha sa mobile phase ng chromatographic column.
- Amplification. Isinasagawa ang pagsusuri sa device-thermostat cycler. Pinapainit at pinapalamig nito ang mga test tube na may tiyak na cyclicity. Para sa isang pag-aaral, hanggang 35 cycle ang ginagawa. Ang resulta ay sapat na bilang ng mga fragment ng DNA upang matukoy, matukoy at masuri ang pathogen.
- Electrophoresis. Ang mga nagresultang mga fragment ay inilalagay sa isang gel na may iba't ibang saturation ng agarose at electrophoresis ay ginanap. Ang resultang electropherogram ay sinusuri sa isang computer.
Hindi lamang ang karaniwang PCR study ang ginagamit, kundi pati na rin ang Real Time PCR analysis. Ito ay real time diagnostics. Ang pamamaraan ay nagbibigay-daan para sa pagsusuri ng husay at dami, na ginagawang posible upang matukoy ang pagbuo at dinamika ng sakit, pati na rin magreseta ng therapy na naglalayong alisin ang sanhi ng pinagmulan ng patolohiya. Ginagamit din ang real-time na PCR upang matukoy ang isang purong kultura ng mga nakakahawang ahente (genotyping).
Paano ginagawa ang polymerase chain reaction test
Para sa pagsusuri, maaaring gamitin ang anumang biological fluid ng tao. Ang biomaterial para sa pagsusuri para sa hepatitis C ay karaniwang dugo.
Sampling para sa diagnostics ay isinasagawa sa pamamaraanopisina. Upang kumuha ng dugo, gumamit ng mga disposable test tube na may substance na pumipigil sa pamumuo ng dugo. Ang mga aktibidad na nakatuon sa pagpigil sa pagkalat ng mga nakakahawang ahente ay nakakatulong upang maiwasan ang pagpasok ng isa pang strain ng microorganism mula sa labas.
Ang dugo para sa PCR ng hepatitis C ay kinukuha sa umaga nang walang laman ang tiyan. Ang sample ay ipinadala kaagad sa laboratoryo. Pinapayagan na iimbak ang biomaterial sa temperatura na +4 hanggang +8 degrees Celsius. Ang mga lalagyan ay may label at binibigyan ng mga direksyon. Available ang mga resulta ng pagsubok sa loob ng 48 oras, minsan mas maaga.
Mga Uri ng PCR
Ang saklaw ng paggamit ng polymerase chain reaction ay medyo malawak. Tinutukoy ng mga infectionist gamit ang PCR hepatitis B, mga sakit na ipinadala ng mga insekto na sumisipsip ng dugo, AIDS, tuberculosis. Sa oncology, gamit ang paraang ito, ang mga tumor cell ay natukoy sa maagang yugto.
Mayroong labing-apat na uri ng pagsusuri. Ang paggamit ng isa o ibang uri ay depende sa saklaw at huling resulta ng mga pagsusuri. Ang ilang uri ng PCR ay kailangang-kailangan kung saan kailangan ang resulta sa loob ng 20 minuto.
Upang masuri ang hepatitis C, 3 uri ng polymerase chain reaction ang ginagamit:
- Ang qualitative assessment ay maaaring maging positibo, na nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng impeksyon sa katawan, o negatibo, na nagpapahiwatig ng kawalan ng flavivirus.
- Real-time PCR (quantitative analysis) - tinutukoy ang quantitative RNA ng pathogen sa IU/ml.
- Ang Genotyping ay isang pagsusuri na nagpapakita ng uri (genotype) ng virus.
Upang tumpak na matukoy at matukoy ang sakit, na sinusundan nglahat ng tatlong uri ng pag-aaral ay ginagamit upang magreseta ng pinakamainam na therapy.
Qualative polymerase chain reaction analysis
Ang pagsusuri ay sapilitan para sa lahat na may ELISA na nakakita ng mga antibodies sa HCV. Ang qualitative PCR para sa hepatitis C ay ang karaniwang susceptibility test. Ang pamamaraan ay naglalayon lamang sa pagtuklas, walang pagbibilang o paghihiwalay ng iba pang mga sangkap na ginagawa.
Upang makakita ng mga antibodies, ginagamit ang mga espesyal na sistema ng pagsubok na may sensitivity threshold na hindi bababa sa 50 IU/ml. Kung nakita ang mga antibodies, inireseta ang iba pang mga pagsusuri sa paglilinaw. Kung negatibo ang resulta, wala nang gagawing pagsusuri.
Sa ilang mga kaso, ang isang maling negatibong resulta ay maaaring dahil sa walang kakayahan na kawani ng lab o mahinang kalidad ng mga reagents. Para sa insurance, mas mabuting kunin muli ang pagsusuri sa ibang lugar.
Quantitative PCR
Ang pamamaraan ay ginagamit upang direktang pag-aralan ang bilang ng flavivirus sa isang ikot ng reaksyon. Para sa tumpak na pagsukat, ginagamit ang mga fragment ng DNA para sa hybridization o mga primer na may label na fluorescently. Mayroong matipid na opsyon sa pagtuklas gamit ang SYBL Green dye. Ang dye ay nakakabit sa isang maliit na uka sa DNA at nagiging asul kapag na-irradiated ng laser.
Ang konsentrasyon ay tinutukoy ng apparatus-amplifier sa digital equivalent. Maaaring bahagyang mag-iba ang mga halaga sa pagitan ng mga lab at samakatuwid ay dapat ikumpara sa mga reference na halaga.
Quantitative PCRNakakatulong ang hepatitis C na piliin ang pinakamainam na dosis ng mga gamot at matukoy ang tagal ng therapy. Ang dalas ng pag-aaral ay depende sa yugto ng sakit, ang uri ng genotype at ang iniresetang kurso ng paggamot.
Pagpapasiya ng genotype
Ang hepatitis C virus ay may variable na genetic makeup. Maraming mga pagbabago ang ginagawang imposible na lumikha ng isang bakuna, at nagpapalubha din ng therapy. May kabuuang 11 genotype at 100 subtype ang natukoy at naitala. Sa mga bansa ng dating USSR, sa mga taong nahawaan ng hepatitis C, pangunahing nakikita ng PCR ang mga genotype 1b at 3.
Sa pagkakaroon ng alinman sa mga genotype, maaaring magsaya ang cirrhosis o kanser sa atay. Kaya naman napakahalagang matukoy ang virus sa oras.
Para sa ilang pasyente, nakakalason ang ilang partikular na gamot na idinisenyo upang labanan ang HCV. Binibigyang-daan ka ng genotyping na matukoy ang uri ng protina at magreseta ng mabisang gamot.
Sa mga resulta ng mga pagsusuri sa pagta-type mayroong isang numero na may maliit na titik na Latin na nagsasaad ng genotype ng virus. Kung ang HCV ay nakita ngunit hindi nai-type, nangangahulugan ito na ang tao ay may genotype na hindi karaniwan para sa isang partikular na heograpikal na lugar.
Mga resulta ng pagsusuri
Ang doktor ay tumatalakay sa pag-decipher ng mga resulta. Tanging ang data mula sa ilang pag-aaral (kasama ang anamnesis at pagsusuri) ang makakapagbigay ng pangkalahatang tunay na larawan ng medikal na kasaysayan.
- Sa isang malusog na tao, ang isang pagsubok para sa isang husay na reaksyon sa biomaterial ay walang nakikitang anuman. Kung ang halaga ay "natukoy" ay ipinahiwatig, ang impeksyon ay nakumpirma, at ang pasyentenangangailangan ng karagdagang pagsusuri na sinusundan ng paggamot.
- Ang pagtukoy sa bilang ng mga nakakahawang ahente ay ginagawang posible upang masuri ang viral load sa katawan. Karaniwan, hindi nakikita ng hepatitis C quantitative PCR ang pathogen. Ang isang tagapagpahiwatig ng hanggang sa 810^5 ay itinuturing na isang mababang pagkarga at, sa wastong therapy, ginagarantiyahan ang isang kanais-nais na kinalabasan. Ang mas mataas na halaga ay nangangailangan ng malalim na pagsusuri at pagpapasiya ng pangmatagalang therapy, para sa positibong kinalabasan na walang sinuman ang makakatiyak.
- Ang mga positibong resulta ng genotyping ay nagpapahiwatig kung aling genotype ang kinikilala. Ang negatibong resulta ay nagpapahiwatig ng alinman sa kawalan ng flavivirus o pagkakaroon ng genotype na hindi karaniwan para sa rehiyong ito.
Ano ang ipinahihiwatig ng positibong PCR test
Anumang malalang sakit ay nangangailangan ng komprehensibong pagsusuri. Ang isang positibong hepatitis C PCR ay nagkukumpirma ng diagnosis, ngunit ang mga hula ay maaari lamang gawin pagkatapos ng karagdagang laboratoryo at instrumental na pag-aaral.
Ang pagtuklas ng isang virus ay hindi nagbibigay ng kumpletong larawan ng patolohiya. Kinakailangang kilalanin ang uri at kalikasan nito, upang matukoy kung paano ito nakakaapekto sa atay at iba pang mga organo. Ang maagang pagtuklas ng HCV ay kadalasang may kanais-nais na resulta ng therapeutic.
Negative PCR na may positibong ELISA
Kapag sinusunod ang mga sintomas na katangian ng pinsala sa atay, may mataas na posibilidad na ang impeksyon ay nakapasok na sa katawan. Samakatuwid, dapat kang makipag-ugnayan sa isang hepatologist o isang espesyalista sa nakakahawang sakit. Sa panahon ng mga panayam, kukuha ang espesyalista ng anamnesis at magrereseta ng kinakailangang pagsusuri.
Kungang mga resulta ng mga pag-aaral sa hepatitis C PCR ay negatibo, at ang enzyme immunoassay ay positibo, ito ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng mga antibodies sa flavivirus sa dugo. Karaniwan itong nangyayari kapag ang impeksiyon ay pumapasok sa katawan sa isang maliit na halaga, kaya ang immune system ay nakayanan ito nang mag-isa. Ngunit ang mga taong ito ay itinuturing pa rin na infected at kinakailangang suriin tuwing 6 na buwan. Kung, sa gayong mga resulta ng pagsusuri, ang isang tao ay hindi nabigyan ng libreng medikal na pagsusuri, mas mabuting kumuha ng PCR para sa isang bayad upang mapanatili ang kalusugan, at kung ang mga resulta ay positibo, makipag-ugnayan sa isang espesyalista para sa diagnosis at paggamot.
Mga kalamangan at kawalan ng pamamaraan
Kapag nagtatatag ng diagnosis ng hepatitis C, ang PCR ay may ilang mga pakinabang:
- Maagang pagtuklas ng pathogen.
- Tumpak na kahulugan ng virus.
- Efficiency ng diagnostics.
- Minimum na rate ng error.
- Mataas na sensitivity.
Mga disadvantage ng pamamaraan:
- Mataas na halaga ng pagsusuri. Ang pagsusulit ay nangangailangan ng mamahaling kagamitan, reagents at mataas na kwalipikadong medikal na kawani. Lahat ng sama-sama ay nagdaragdag ng hanggang sa isang malaking halaga.
- Mahigpit na kinakailangan para sa transportasyon ng biomaterial.
Paggamot sa pamamaga ng atay
Ang PCR analysis para sa hepatitis C virus ay itinuturing na pangunahing sa pagsusuri, ngunit hindi tiyak. Para maging mabisa ang therapy, kailangan ng ilang karagdagang laboratoryo at instrumental na pag-aaral. Matapos maipasa lahatmga diagnostic measure na inireseta ng doktor sa paggamot:
- Diet 5 ang inireseta.
- Ganap na hindi kasama ang alak.
- Pinagsamang pagtanggap ng Interferon at Ribavirin sa loob ng 25 araw.
- Mga kurso ng hepaprotectors "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv".
- Sa mga espesyal na kaso, ginagamit ang discrete plasmapheresis.
Ang mga gamot na inireseta ng isang hepatologist ay regular na ginagamit, nang hindi binabago ang dosis. Ang tagal ng pag-inom ng mga gamot ay tinutukoy ng doktor pagkatapos maipasa ang mga control test. Pagkatapos makumpleto ang kurso ng therapy, dapat kang bumisita sa doktor tuwing anim na buwan.
Ang PCR-diagnostics ay nagbibigay-daan upang matukoy ang sanhi ng hepatitis C sa maagang yugto. Nakakatulong ito sa pagiging epektibo ng therapy at pag-iwas sa paglipat ng sakit sa mga mapanganib na anyo gaya ng cirrhosis at hepatocellular carcinoma.
